紫外分光光度儀常見(jiàn)使用問(wèn)題分析（二）
　　故障：紫外分光光度儀沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出
　　原因：沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi)。
　　檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm，狹縫盡量開到寬檔位，在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處，觀察白紙上有無(wú)綠光斑影像。
　　處置：檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位，雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了(耳朵可以聽見(jiàn)電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音)。
　　故障：長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲
　　具體表現(xiàn)：做基線掃描或樣品掃描時(shí)，基線或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲
　　原因：濾光片飼服電機(jī)“失步”，造成檔位錯(cuò)位，國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚。
　　檢查：重新開機(jī)有可能回復(fù)，或打開單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查(注意：打開單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激)。
　　處置：更換飼服電機(jī)；
　　故障：吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)
　　具體表現(xiàn)：當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí)，吸光值信號(hào)上下擺動(dòng)，特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器。
　　原因：開關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良。
　　檢查：用手加重力量按琴鍵時(shí)，吸光值隨之變化。
　　處置：用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可。
　　故障：紫外分光光度儀噪聲較大
　　具體原因：樣品室放入空白后做基線記憶，噪聲較大，紫外區(qū)尤甚。
　　原因：比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈，使放大器超出了校正范圍。
　　檢查：將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm，先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零，然后將空比色皿插入樣品道一側(cè)，此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿；同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小。
　　處置：更換比色皿；更換空白液
　　紫外分光光度儀使用注意
　　1.使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
　　2.取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
　　3.供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
　　4.測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，除另有規(guī)定外吸收度大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以內(nèi)。
　　5.供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
　　6.選用紫外分光光度儀的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。